人視網膜色素上皮細胞

培養步驟:
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備MEM培養基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。

       產品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質量的穩定。在公司技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。

      發貨：客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基；2、說明書及注意事項；3、公司售后服務標準。

      保存和應用：客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h，再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。

細胞分類：

一種：
是凍存產品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態影響較大，一旦細胞狀態不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態影響很大，也不是細胞儲存的方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，進口來源，保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養的優點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
以下是公司正在銷售的相關產品： 

0.094ng/ml兔酰膽(ACh)ELISA試盒HEK-Dual™ hTLR2 (NF/IL8)

18.75pg/ml兔酰膽受體抗體(AChRab)ELISA試盒HEK-Dual™ hTLR3 (NF/IL8)

0.188ng/ml兔8-構前列腺素(8-epi-PGF2α)ELISA試盒HEK-Dual™ hTLR5 (NF/IL8)

46.9pg/ml兔6前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試盒HEK-Dual™ hTLR9 (NF/IL8)

0.094ng/ml兔清總補體(CH50)ELISA試盒HEK-Dual™ IFN-γ cells

0.094ng/ml魚卵黃高蛋白（PV）ELISA試盒HEK-Dual™ mTLR4 (NF/IL8)

46.875pg/ml兔子單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試盒HEK-Dual™ mTLR7 (NF/IL8)

0.188ng/ml魚孕激素/孕（PROG）ELISA試盒 HEK-Dual TNF-α Cells

0.094ng/ml豬低氧誘導因子1α(HIF-1α)ELISA試盒 HEK-Lucia™ RIG-I Cells

0.094ng/ml豬管性友病因子/瑞斯托輔因子(VWF)ELISA試盒J774-Dual™ Cells
人視網膜色素上皮細胞腎小管上皮細胞小鼠管內皮瘤細胞，EOMA細胞

腎小球內皮細胞小鼠胰腺癌beta細胞，BETA-TC-6細胞

子宮內膜上皮細胞小鼠原B細胞株，BAF3細胞

卵巢顆粒細胞小鼠雜交瘤細胞，SDOW-17細胞

淋巴管內皮細胞小鼠正常肝細胞，NCTC1469細胞

淋巴成纖維細胞小鼠子宮頸癌細胞，U14細胞

外周白細胞鴨胚胎成纖維細胞，Duck embryo細胞

胰島β細胞永生型大鼠肝儲脂細胞，HSC-T6細胞

胰腺星狀細胞幼倉鼠腎細胞，BHK-21細胞

胰腺導管上皮細胞正常小鼠睪丸Sertoli細胞，TM4細胞

頜下腺上皮細胞中國倉鼠肺細胞，CHL細胞

腮腺細胞中國倉鼠卵巢細胞k1 亞克隆系，CHO-K1細胞

視網膜微管內皮細胞中國倉鼠卵巢細胞（缺失二葉還原酶），CHO-dhfr細胞

小梁網細胞中國倉鼠卵巢細胞，CTLA4 IG-24細胞

視網膜色素上皮細胞豬鼻黏膜成纖維細胞，PT-K75細胞